分光光度計，簡稱光度計，又稱光譜儀，已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。分光光度計測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。根據(jù)可測量波長范圍的不同，分光光度計常分為：紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。今天搜科采購管家重點為您介紹的是可見分光光度計的選購注意事項。
按照慣例，在選購儀器之前我們先要摸清自己的需求：
你們實驗室使用分光光度計的常規(guī)應用有哪些？
你們對分光光度計的靈敏度有何要求？
是否多人共用一臺分光光度計？
是否需要同時測量多個樣品？
要測量樣品的體積范圍是怎樣的？
對分光光度計的使用頻率和使用時長是怎樣的？
以上問題的答案，可能會影響您對可見分光光度計的功能要求、靈活性要求、帶寬要求，是否需要預設程序等智能功能等等。如果使用頻率高、時間長，對產(chǎn)品的質(zhì)量和耐久性就有比較高的要求。
帶著這些問題，我們來看看可見分光光度計產(chǎn)品都有哪些功能和特點，其中又有哪些是選購時必須考慮的硬性指標。
1、儀器的原理和主要部件
分光光度計主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。
其工作原理是：
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收。樣品對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該樣品的物理常數(shù)。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定，故又稱比色分析。
從以上原理，可以引出分光光度計最重要的配件——比色杯。
比色杯按照材質(zhì)大致分為石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根據(jù)不同的測量體積，有比色杯和毛細比色杯等。
2、分光光度計的常見用途
可見分光光度計是在可見光區(qū)域內(nèi)對物質(zhì)做定性、定量分析。常見的用途有以下幾種：
（1）比色法蛋白質(zhì)定量
比色法的測定原理是組成蛋白質(zhì)的氨基酸（如酪氨酸，絲氨酸）與外加的顯色基團或者染料反應，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應的氨基酸數(shù)目直接相關(guān)，從而反應蛋白質(zhì)濃度。
（2）核酸的定量
核酸的定量是分光光度計使用頻率最高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈dna，以及rna。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應的系數(shù)。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算，從而得出相應的樣品濃度。
（3）od600細菌細胞密度
實驗室確定細菌生長密度和生長期，多根據(jù)經(jīng)驗和目測推斷細菌的生長密度。在遇到要求較高的實驗，需要采用分光光度計準確測定細菌細胞密度。od600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長的標準方法。
3.性能參數(shù)指標
（1）波長
波長范圍、波長查找方式、波長的準確度和重復性都是需要考慮的重要指標。
波長涵蓋范圍越大越好，自動查找比手動查找好，所示波長和實際波長越符合越好。
（2）帶寬
分光光度計的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。狹縫寬度參數(shù)，以及狹縫寬度是固定的還是連續(xù)可選的，都代表著該儀器的性能。
（3）能測量的樣品量
樣品量也是重要的考量因素。如果比色杯容量太大，那測量珍貴樣品時是非常浪費的?，F(xiàn)在很多光度計的樣品量都趨于微量化了。
（4）光度準確度
光度準確度指實際測量的光度讀數(shù)值與真值之差?？隙ㄊ菧蚀_度越高越好。
（5）雜散光
雜散光是光譜測量中誤差的主要來源。雜散光越小越好。
（6）穩(wěn)定性
穩(wěn)定性是精密測量儀器的硬性指標，測量結(jié)果肯定是越準確、越穩(wěn)定越好。
（7）噪聲
噪聲肯定是越小越好，這個不用解釋。
（8）儀器的大小
很多實驗室空間有限，滿足使用要求的基礎(chǔ)上，儀器肯定是占地面積越小、重量越輕越好。